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藥敏試驗怎么做:紙片擴散法實驗詳解
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藥敏試驗,又稱藥物敏感度試驗或耐藥試驗,是一種用來評估某一種微生物(如病毒、細菌等)對特定抗生素的敏感程度或耐受程度的檢測方法。在藥敏試驗中,常用的藥物指的是抗生素類藥物,而微生物的敏感度主要包括對該藥物的敏感、中介和耐藥三種情況。通過藥敏試驗,可以幫助醫(yī)療專業(yè)人員選擇最有效的藥物治療感染病原體,從而提高治療效果并減少抗生素濫用的風險。
作為第三方檢測中心,中科檢測機構(gòu)擁有CMA和CNAS認證檢測資質(zhì),檢測設(shè)備齊全,數(shù)據(jù)科學可靠,可出具國家認可的藥物藥敏試驗報告。
藥敏試驗目的
藥敏試驗的目的主要包括三個方面。首先,通過藥敏試驗可以指導治療,幫助醫(yī)療從業(yè)人員了解病原微生物對各種抗生素的敏感或耐受程度,從而合理選擇抗生素類藥物進行治療,避免盲目使用藥物,降低治療過程中的成本,并縮短治療周期。
其次,藥敏試驗也可用于耐藥監(jiān)測,及時發(fā)現(xiàn)和解決由抗生素濫用導致的耐藥性問題,對維護公共衛(wèi)生安全和控制傳染病的傳播十分重要。
最后,藥敏試驗還可以用于新藥驗證,通過與現(xiàn)有藥物的對比試驗評估新藥對病原微生物的抑制或殺滅效果,為新藥的臨床應用提供依據(jù),也是驗證新藥療效和安全性的重要手段之一。
紙片擴散法基本原理
紙片擴散法是一種常用的藥敏試驗方法,其基本原理是將浸有抗菌藥的紙片貼在涂有致病菌的瓊脂平板上。隨著紙片中所含的藥物溶解并不斷擴散,形成遞減的梯度濃度,周圍形成抑菌圈。
在抑菌圈范圍內(nèi),待檢菌的生長被抑制,并產(chǎn)生透明的抑菌圈。抑菌圈的直徑大小反映了待測菌對抗菌藥物的敏感程度,通常與該藥對待檢菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負相關(guān)關(guān)系,即抑菌圈愈大,MIC值愈小。這種方法可快速、簡便地評估細菌對特定抗生素的敏感性,為醫(yī)療決策提供重要參考依據(jù)。
紙片擴散法具體步驟
制備菌懸液:從過夜培養(yǎng)的菌落中挑取細菌,接種到生理鹽水中,調(diào)整懸液的濁度至0.5麥氏單位。
接種平板:用無菌棉簽將菌懸液均勻涂布在瓊脂平板表面,確保細菌分布均勻。
放置藥敏紙片:將含有定量抗菌藥物的紙片貼在接種好的瓊脂平板上,確保紙片與瓊脂表面完全接觸。
孵育:將平板倒置于35℃的孵箱中孵育16-18小時。
測量抑菌圈:孵育后,用游標卡尺測量紙片周圍的抑菌圈直徑,根據(jù)抑菌圈的大小判斷細菌對藥物的敏感性。
結(jié)果分析
抑菌圈的大小反映了細菌對抗菌藥物的敏感程度。抑菌圈越大,表示細菌對該藥物越敏感。根據(jù)抑菌圈的直徑,可以將細菌對藥物的反應分為敏感(S)、中介(I)和耐藥(R)三種類型。
"敏感"表示使用某種藥物的常規(guī)劑量時,能夠有效治療該種細菌引起的感染,因為藥物在體內(nèi)的平均血藥濃度達到MIC的5倍或以上。
"中介"指在應用較高劑量的抗菌藥物時才能有效抑制細菌引起的感染,或者細菌處于體內(nèi)抗菌藥物濃縮的部位或體液中時才被抑制。通常,中介狀態(tài)下的平均血藥濃度接近或略高于細菌的MIC。對于毒性較小的藥物,通過適量增加劑量也可獲得良好的臨床治療效果。
"耐藥"表示該藥物對某一細菌的MIC高于在血液或體液中可能達到的濃度,或者細菌產(chǎn)生滅活抗菌藥物的酶或其他耐藥機制。即使該細菌的MIC較低,仍應判斷該細菌屬于耐藥狀態(tài)。舉例來說,對產(chǎn)生青霉素酶的金黃色葡萄球菌而言,其對青霉素即屬于耐藥狀態(tài)。
根據(jù)紙片擴散法的藥敏試驗結(jié)果,可準確評估細菌對抗生素的敏感情況,為醫(yī)療決策提供重要指導。
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